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Correo Científico Médico de Holguín 2003;7(3)
Trabajo original
Facultad de
Ciencias Médicas. Holguín
Comportamiento
del volumen nuclear y del infiltrado
inflamatorio en las hepatitis virales aguda y crónica. Hospital “V. I. Lenin”. Holguín.
2001.
Behaviour of the nuclear volume
and the inflamatory infiltration in acute viral hepatitis and chronic hepatitis.
“V. I. Lenin”
Hospital. Holguín 2001.
Elizabeth
Leyva Sánchez1, Nancy Rios
Hidalgo2, Lourdes Rodríguez Ramírez3, Pedro Díaz Rojas4.
2 Especialista de Segundo Grado
en Anatomía Patológica. Profesor Titulare. Facultad de Ciencias
Médicas de Holguin.
3 Especialista de Segundo Grado
en Histología. Profesor Asistenete. Facultad de Ciencias Médicas
de Holguin.
4 Especialista
de Segundo Grado en Histología. Profesor Titular. Facultad de Ciencias
Médicas de Holguin.
RESUMEN
El presente trabajo se realizó a partir de 20 muestras de tejido hepático obtenidas de pacientes portadores de hepatitis viral aguda (10) y hepatitis crónica (10) provenientes del Departamento de Anatomía Patológica del Hospital Provincial Docente V.I. Lenin.
Se determinó el volumen nuclear de los hepatocitos y la densidad el infiltrado inflamatorio en las tres zonas del lobulillo hepático clásico en cada muestra.
Los resultados mostraron que los mayores valores del volumen nuclear se encuentran en la zona intermedia en la hepatitis viral aguda y en la zona central en la hepatitis crónica.
El comportamiento del infiltrado inflamatorio fue semejante en ambos tipos de hepatitis, encontrándose los mayores valores en al zona portal.
Se encontraron diferencias altamente significativas al compara los valores de las variables estudiadas a nivel de la zona intermedia y central en ambas enfermedades.
Palabras claves: volumen Nuclear, infiltrado inflamatorio, hepatitis viral
ABSTRACT
This work was done with 20 sample of hepatic tissue from patientes sufferring from acute viral hepatitis (10) and chronic hepatitis (10) comino fron the Depatament of Pathologic Anatomy of the Teaching Provincial Hospital “V.I. Lenin”. The nuclear volume of the hepatocytes and the density of the inflamatory infiltration were determined in the three zone of the classic hepatic lobule in each sample.
The results showed tha the higher values of nuclear volume were in the intermediate zone un the acute viral hepatitis and in the central zone in the chronic hepatitis. The behaviour of the inflamatory infiltration was similar un both types of hepatitis and the highest values were found in the portal zone.
High meaningful differences were found when the values of the studies variables were compared at the level of the intermediate and central zone in both diseases.
Key words: Nuclear volume, Inflamatory infiltation, Viral hepatitis.
INTRODUCCIÓN
El Hígado es uno de los órganos que con mayor frecuencia sufre alteraciones y posee una enorme capacidad de reserva y de regeneración. Cuando el resto del parénquima hepático es normal, una persona puede sobrevivir tras la ablación de alrededor del 80 % de su hígado. Desde el punto de vista de la circulación es un órgano menos oxigenado que el corazón, cerebro, riñón, ya que aproximadamente el 70 % de la sangre viene de la vena porta. (1-6)
En las hepatitis tanto viral aguda como crónica se observan muchas veces lesiones histológicas que son semejantes principalmente las referentes a las lesiones de hepatocitos, ya que se pueden encontrar necrosis focales, parcelares y en puentes en ambas enfermedades y el infiltrado inflamatorio linfomonocitario periportal fundamentalmente, es un signo histológico que también puede estar presente en los dos tipos de hepatitis; por ello cuando no existe bien definido el tiempo de evolución de la enfermedad desde el punto de vista clínico resulta en ocasiones difícil el diagnóstico anatomopatológico. (7-17)
Las lesiones pueden variar de intensidad incluso en zonas diferentes de una misma biopsia hepática, lo que se hace aún más complejo cuando la muestra se trata de un cilindro hepático, el que representa alrededor 1/50,000 del parénquima. (5,6)
Todo esto puede llevar a diagnósticos diferentes entre patólogos, interpretaciones desacertadas, evaluaciones pronosticas en ocasiones erradas, unas veces por exceso y otras por defecto, producto del criterio subjetivo del anatomopatólogo; el cual aunque acostumbre a efectuar una descripción histológica previa de la muestra examinada para llegar a conclusión diagnóstica, siempre tendrá en su contra que la evaluación es del tipo cualitativo y normalmente no se cuantifica el grado de lesión, por lo que a veces las biopsias no son del todo concluyente o aportan insuficientes parámetros para que el médico de asistencia tome una conducta adecuada con el paciente.
Teniendo en cuenta que actualmente tenemos la existencia de la Estereología y la Morfometría en el campo de la Microscopia, donde a través de la imagen plana del microscopio y diversos tipos de testajes, técnicas y fórmulas matemáticas se obtienen indicadores de estructuras tridimensionales a nivel de los tejidos, existe la posibilidad de evaluar la biopsia de forma cuantitativa, lo que por supuesto resulta más beneficioso para un diagnóstico más certero y completo, para una adecuada evaluación pronostica y conducta futura con el caso. (18-40)
Resultará indudablemente útil la aplicación de esos métodos en el diagnóstico de una biopsia hepática ya que permitirá a través de evaluaciones cuantitativas perfeccionar la calidad de los diagnósticos anatomopatológicos, seleccionar con más certeza la conducta terapéutica y evaluar con más rigor la evolución de la enfermedad y efectuar un pronóstico de la misma en el paciente. Por ello es que nos ha motivado la realización de esta investigación.
OBJETIVOS
General
Contribuir al conocimiento de indicadores morfométricos en hígados con hepatitis viral aguda y crónica.
Específicos
Determinar el volumen nuclear en biopsias de pacientes portadores de hepatitis viral aguda y hepatitis crónica.
Determinar la densidad inflamatoria en las biopsias con estas características.
Comparar los resultados del volumen nuclear y del infiltrado inflamatorio en las zonas típicas del lobulillo clásico dentro de cada enfermedad y entre ellas.
MÉTODO
El presente trabajo es un estudio de serie de casos de 10 pacientes con el diagnóstico de hepatitis crónicas y 10 pacientes con el diagnóstico de hepatitis viral aguda.
Se realiza a partir de los cilindros hepáticos provenientes de biopsias recibidas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Provincial Docente “V. I. Lenin”.
Se excluyeron de esta investigación los cilindros hepáticos que tenían menos de dos espacios portas.
Todas las muestras se procesaron por la técnica clásica de la parafina. Se realizaron cortes de aproximadamente 6 a 8 micrómetros los que se colorearon con hematoxilina y eosina bajo control de pH.
Se efectuó el diagnóstico cualitativo de los mismos.
Se observaron las preparaciones histológicas, escogiendo zonas alrededor del espacio porta, en la zona intermedia de la vena central, de esa forma se seleccionaron dos espacios porta, dos venas centrales y dos zonas medias de cada biopsia y se seleccionaron cinco zonas de cada una de estas estructuras realizándose tantas mensuraciones como la imagen lo permitió con un sistema morfemétrico denominado Computer Assisted Morpho Stereologic System Using Digital Image (COMSDI – PLUS) diseñado en nuestra Facultad soportado en una microcomputadora IBM (USA, 1985) con tarjeta digitalizadora Eye Graber (USA, 1990) acoplada con un monitor multisincrónico Emerson (Sub Corea 1990) que recoge las Imágenes a través de un microscopio Olympus (Japón 1985) con cámara de televisión Koyo (Japón, 1990), se procedió a realizar las siguientes opciones apoyados con un mouse Genius (Taiwan, 1990). (40)
Volumen nuclear de hepatocitos: Se utilizó la fórmula de Palkovits II, trabajando la preparación histológica en inmersión para ello utilizando el COMSDI PLUS.
Se midieron todos los núcleos que aparecían en la pantalla aplicando luego la fórmula de:
Volumen nuclear absoluto según Palkovits:
V = 1.04 p (ab) Öab
a = diámetro mayor
b = diámetro menor
1. Densidad del infiltrado inflamatorio.
Se utiliza el COMSDIPLUS trabajando la preparación histológica en inmersión y con la opción de conteo se leyeron todas las células que aparecieron en la imagen digitalizada.
Se determinó el valor promedio, la desviación estándar, coeficiente de variación, análisis de varianza, valor crítico de Tukey y comparación entre medias para los indicadores estudiados. Este procesamiento se llevó a efecto con la ayuda del paquete estadístico. SYSTAT versión 3.0 (España 1986) en un microprocesador marca IBM de 640 Kb de memoria. (41)
Los resultados se muestran en cuadros y gráficos.
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN
En nuestro estudio se obtuvieron los siguientes resultados referentes a los casos de
Hepatitis Viral Aguda:
La mayor media del volumen nuclear se encuentra en la zona intermedia (626,04) y la menor en la zona periportal (514,52), lo cual consideramos está en relación con la diferencia de irrigación de estas zonas, ya que el área portal es la mejor irrigada, los nutrientes llegan con mejor calidad y los fenómenos de división celular ( en los cuales el núcleo juega un papel fundamental) son más expresados en esta área debido a la citogénesis, por otro lado hacia la zona intermedia el metabolismo celular es mayor, la actividad nuclear se incrementa y por tanto el volumen del mismo, expresado en la mejor diferenciación de las células, además se conoce que los hepatocitos en su ciclo de vida se desplazan hacia la vena central que es la zona menos irrigada y a medida que esto ocurre los signos de muerte celular se van haciendo más evidentes hasta que mueren y mucho autores describen que caen en la misma vena, por otro lado está comprobado que los sitios de regeneración hepática son los que están cerca de la vena centrolobulillar en los procesos patológicos. (1, 2, 4, 5)
El análisis de varianza muestra que al comparar los resultados obtenidos de los volúmenes nucleares en las diferentes áreas del lobulillo hepático hay diferencias significativas, pero cuando aplicamos el test de Tuckey como una prueba “a posteriori” para comparar las medias comprobamos que hay diferencias altamente significativas entre la zona intermedia y central respecto al espacio porta (cuadro 1).
La densidad del infiltrado inflamatorio mostró la mayor media en la zona periportal 30,264, en la zona de la vena central el valor fue de 6,2264 y en la intermedia de 4,6, lo cual explicamos sea producto de que los fenómenos vasculares existentes en el proceso inflamatorio ocurren primero en esta zona, por ser la más y mejor irrigada y por ello la mayor cantidad de leucocitos se acumulará aquí.(1, 2, 4)
El análisis de la varianza dio como resultado que al comparar los resultados obtenidos de las densidades de los infiltrado inflamatorios en las diferentes áreas del lobulillo hay diferencias significativas, pero cuando aplicamos el test de Tuckey como una prueba “a posteriori” para comparar las medias comprobamos que sólo hay diferencia altamente significativas entre la zona periportal y el resto de las áreas (cuadro 2).
Al analizar las biopsias de Hepatitis Crónica se observa:
La mayor media del volumen nuclear se encuentra en la zona central (1204,1) y la menor en la zona periportal (504,76) lo cual consideramos sea debido a la diferencia de irrigación en esas áreas, al igual que en los procesos agudos y además a que en la etapa de cronicidad los hepatocitos producto de la capacidad de regeneración del hígado, se regeneran en los sitios cercanos a la vena centrolobulillar donde vamos a encontrar células poliploides de núcleos de gran tamaño debido a la necesidad de recuperación del órgano, aunque normalmente esta zona regenerativa en órganos sanos se localiza en las áreas periportales o citogenéticas. Conocemos además que los hepatocitos se desplazan en su ciclo de vida hacia la vena central y al acercarse al final de su vida sufren hipertrofia e hiperplasia celular lo que naturalmente incluye al núcleo, lo que justifica también la presencia de los valores altos del volumen nuclear a este nivel. (1, 2, 4, 5,)
El análisis de varianza muestra que al comparar los resultados obtenidos de los volúmenes nucleares en las diferentes áreas del lobulillo hay diferencias significativas, pero cuando aplicamos el test de Tuckey como una prueba “a posteriori” para comparar las medias comprobamos que solo hay diferencia altamente significativa entre la zona pericentrolobulillar y el resto de las áreas (cuadro 3).
Al analizar la densidad del infiltrado inflamatorio observamos la mayor media en la zona periportal (42,16), lo cual explicamos por la mayor cantidad de irrigación de la zona y ser además, en el caso de las hepatitis crónicas un proceso inflamatorio por lo regular activo.
El análisis de la varianza que al comparar los resultados obtenidos de las densidades de los infiltrado inflamatorios en las diferentes áreas del lobulillo hay diferencias significativas, pero cuando aplicamos el test de Tuckey como una prueba “a posteriori” para comparar las medias comprobamos que solo hay diferencia altamente significativa entre la zona intermedia y central respecto a la zona porta. (Cuadro 4).
Después de analizadas las biopsias de los casos de hepatitis viral aguda y hepatitis crónica individualmente, se estableció una comparación entre los diferentes indicadores estudiados y su comportamiento en ambas enfermedades y los resultados son como siguen:
Referente al volumen nuclear:
En cuadro 5 se aprecia que las medias de la zona intermedia y la portal no muestran diferencias significativas en los valores del volumen nuclear, no ocurriendo así a nivel de la vena centrolobulillar donde existe diferencia altamente significativa.
Al analizar la densidad del infiltrado inflamatorio encontramos:
En el cuadro 6 se aprecia que al comparar las medias a nivel de la zona intermedia existen diferencias altamente significativas lo que no ocurre a nivel de la vena central y de la zona portal.
A partir de estos resultados es posible pensar que en la hepatitis crónica el aumento de los valores del volumen nuclear en la zona de la vena central se deba a la necesidad de respuesta de este órgano al proceso patológico a que está siendo sometido, lo que puede explicarse que en el proceso hacia la cronicidad se produce el desplazamiento de los procesos de regeneración e incorporación de las actividad metabólica alta tratando de compensar el daño persistente.
Cuando analizamos el comportamiento de la densidad del infiltrado inflamatorio, se aprecia que en la hepatitis viral aguda todas las zonas del lobulillo hepático clásico responden al proceso inflamatorio, sin embargo en la hepatitis crónica la persistencia del proceso hace que la zona portal sea la máxima responsable del foco inflamatorio.
Cuadro 1. Prueba “a posteriori” basada en el test de Tuckey para el Análisis de Varianza para el volumen nuclear en los pacientes con hepatitis viral aguda.
Variable |
Media |
Espacio porta |
Vena central |
514,52 |
608,56 |
||
Zona intermedia |
626,04 |
111,52 |
18 |
Vena central |
608,56 |
94,56 |
- |
Valor crítico de Tuckey para p < 0,005 = 3,314
Fuente: Datos del autor.
Cuadro 2. Prueba “a posteriori” basada en el test de Tuckey para el Análisis de Varianza para la densidad de infiltrado inflamatorio en pacientes con hepatitis viral aguda.
Variable |
Media |
Zona intermedia |
Vena central |
4,60 |
6,2262 |
||
Espacio porta |
30,2640 |
25,66 |
24,03 |
Vena central |
6,2262 |
1,62 |
- |
Valor crítico de Tuckey para p < 0,005 = 3,314
Fuente: Datos del autor.
Cuadro 3. Prueba “a posteriori” basada en el test de Tuckey para el Análisis de Varianza para el volumen nuclear en los pacientes con hepatitis crónica
Variable |
Media |
Espacio porta |
Zona intermedia |
504,76 |
623,81 |
||
Vena central |
1204,1 |
699,34 |
580,29 |
Zona intermedia |
623,81 |
119.01 |
- |
Valor crítico de Tuckey para p < 0,005 = 3,314
Fuente: Datos del autor.
Cuadro 4. Prueba “a posteriori” basada en el test de Tuckey para el Análisis de Varianza para la densidad de infiltrado inflamatorio en pacientes con hepatitis viral aguda.
Variable |
Media |
Vena central |
Zona intermedia |
0,0833 |
0,2292 |
||
Espacio porta |
42,167 |
42,08 |
41,93 |
Zona intermedia |
0,2292 |
0.14 |
- |
Valor crítico de Tuckey para p < 0,005 = 3,314
Fuente: Datos del autor.
Cuadro 5. Volumen nuclear comparado por zonas y entre los tipos de hepatitis.
Variable |
Media |
Desviación estándar |
Zona intermedia |
||
Hepatitis viral aguda |
626,04 |
267,16 |
Hepatitis crónica |
623,81 |
376,82 |
Vena central |
||
Hepatitis viral aguda |
608,56 |
283,45 |
Hepatitis crónica |
1204,10 ** |
370,50 |
Espacio porta |
||
Hepatitis viral aguda |
514,52 |
215,83 |
Hepatitis crónica |
504,76 |
296,93 |
** Valor de t = 4,056 p<0,001
Fuente: Datos del autor.
Cuadro 6. Densidad de infiltrado inflamatorio comparado por zonas y entre los tipos de hepatitis.
Variable |
Media |
Desviación estándar |
Zona intermedia |
||
Hepatitis viral aguda |
4,2653 ** |
5,8764 |
Hepatitis crónica |
0,2292 |
1,1893 |
Vena central |
||
Hepatitis viral aguda |
6,2264 |
10,063 |
Hepatitis crónica |
0,1087 |
0,3788 |
Espacio porta |
||
Hepatitis viral aguda |
30,264 |
16,405 |
Hepatitis crónica |
42,167 |
16,860 |
** Valor de t = 2,134 p<0,05
Fuente: Datos del autor.
CONCLUSIONES
El mayor volumen nuclear en la hepatitis viral aguda se muestra en el área intermedia del lobulillo hepático y existen diferencias altamente significativas entre las medias de la zona portal y el resto de las áreas.
El mayor volumen nuclear en la hepatitis crónica se observa en la zona central y existen diferencias altamente significativas entre ella y el resto de las zonas.
La mayor densidad de infiltrado inflamatorio tanto en la hepatitis viral aguda, como en la hepatitis crónica se encuentra en la zona portal y existen diferencias altamente significativas entre dicha zona y el resto de las áreas en ambos casos.
La respuesta inflamatoria tiene un carácter generalizado en la hepatitis viral aguda con mayor predominio en la zona porta, mientras que en la hepatitis crónica el proceso se circunscribe con mayor intensidad en esta última zona.
En la hepatitis viral aguda la mayor actividad metabólica podemos localizarla en la zona intermedia, mientras que en la hepatitis crónica los valores se desplazan hacia la vena central.
BIBLIOGRAFÍA
Correspondencia: Dra. Elizabeth leyva Sánchez. Facultad de Ciencias Médicas de Holguín. Ave. lenin No. 4. Holguín 80100. Correo electrónico: lisi@cristal.hlg.sld.cu